Från aska av gamla konflikter uppstår en ny terror. The Umbrella Corporation och dess grödor av dödliga virus har förstörts och förvarats. Men ett nytt farligare hot har uppstått. År efter att ha överlevt händelserna i Raccoon City, har Chris Redfield kämpat mot gissel av bioorganiska vapen över hela världen. Chris är nu medlem i Bio-terrorism Security Assessment Alliance (BSAA), skickad till Afrika för att undersöka ett biologiskt medel som omvandlar befolkningen till aggressiva och störande varelser. En lokal BSAA-agent, Sheva Alomar ansluter och de två måste arbeta tillsammans för att lösa sanningen bakom de störande händelser.
Resident Evil 5 introducerar ett revolutionerande nytt co-op spelläge till serien, så att spelare upplever rädsla tillsammans när terrorn flyttar sig ur skuggorna och in i dagens ljus.